試劑盒采用經典雙抗體夾心法：微孔板內預包被高特異性的家蠶LT單克隆捕獲抗體，加入待測樣本后，樣本中的LT蛋白與固相抗體結合；再加入HRP（辣根過氧化物酶）標記的檢測抗體，形成“捕獲抗體-LT-酶標抗體”的三明治免疫復合物；經TMB底物顯色后，在450nm波長下測定吸光度，顏色深淺與LT蛋白濃度呈正相關，通過標準曲線即可精準換算出樣本中LT的實際含量。

操作流程：

所有試劑提前從冰箱取出，回溫至20~25℃，按比例稀釋濃縮洗滌液，梯度配制不同濃度的LT標準品

分別設置空白孔、標準孔、待測樣品孔，每孔加入100μl標準品或處理好的待測樣本，封板后37℃孵育90分鐘

棄去孔內液體，拍干后加滿洗滌液靜置30秒，重復洗板5次；每孔加入HRP標記酶標試劑50μl（空白孔除外），37℃再孵育60分鐘

再次洗板5次后，依次加入顯色劑A、B各50μl，輕輕混勻后37℃避光顯色15分鐘

每孔加入50μl終止液終止反應，15分鐘內用酶標儀在450nm波長下測定各孔吸光度（OD值），通過標準曲線擬合計算出樣本中LT蛋白的實際濃度